ELISA тесті: принципі қандай?

ELISA тесті: принципі қандай?

Анықтама: ELISA сынағы дегеніміз не?

Байланысты фермент иммуноабсорбциясын талдау әдісі – ағылшын тілінде Enzyme-Linked Immuno Assay – немесе ELISA сынағы биологиялық үлгідегі молекулаларды анықтауға немесе талдауға мүмкіндік беретін иммунологиялық сынақ болып табылады. Оны 1971 жылы Стокгольм университетінде екі швед ғалымы Питер Перлман мен Ева Энгвалл концептуализациялады және әзірледі.

ELISA әдісімен зерттелетін молекулалар негізінен белоктар болып табылады. Ал үлгі түрлеріне сұйық биологиялық материалдар – плазма, сарысу, несеп, тер –, жасуша өсіретін орта немесе рекомбинантты ақуыз – генетикалық материалы генетикалық рекомбинация арқылы өзгертілген – ерітіндіге тазартылған жасуша өндіретін ақуыз жатады.

ELISA сынағы негізінен иммунологияда үлгідегі ақуыздардың, антиденелердің немесе антигендердің болуын анықтау және/немесе өлшеу үшін қолданылады. Бұл серологиялық тест, атап айтқанда, вирустық ластануға жауап ретінде ағзаның өндіретін антиденелерін анықтайды.

Жұқпалы ауруларға арналған ELISA тестінің принципі

Жұқпалы ауруларды диагностикалау үшін антиденелерді қолдану нақты және жылдам әдісті білдіреді. ELISA әдісі – биологиялық үлгі бойынша антиген – тірі организм бөгде деп санайтын дене – және фермент маркері арқылы жасалған түсті реакцияны пайдалана отырып, антидене арасындағы реакцияларды бейнелеуге мүмкіндік беретін иммуноферменттік әдіс – әдетте сілтілі фосфатаза және пероксидаза – бұрын антиденеге қосылған. Түс реакциясы оқшауланған бактерияның идентификациясын немесе қажетті вирустың болуын растайды және түстің қарқындылығы берілген үлгідегі антигендер немесе антиденелердің мөлшерін көрсетеді.

ELISA сынақтарының әртүрлі түрлері

ELISA тестінің төрт негізгі түрі бар:

  • ELISA тікелей, антиденелерді анықтауға немесе өлшеуге мүмкіндік береді. Ол тек бастапқы антиденені пайдаланады;
  • ELISA жанама, ең көп қолданылатыны, сонымен қатар антиденелерді анықтауға немесе талдауға мүмкіндік береді. Ол тікелей ИФА-ға қарағанда жақсы сезімталдық беретін қайталама антиденені пайдаланады;
  • ELISA бәсекелестікте, антигендердің дозалануына мүмкіндік береді. Байланыстар үшін бәсекелестік арқылы өндірілген, ол ферментті пайдаланбайды;
  • ИФТ «сэндвичтегі», антигендердің дозалануына мүмкіндік береді. Бұл әдіс көбінесе зерттеуде қолданылады.

ELISA тестін қолдану

ELISA сынағы мыналар үшін қолданылады:

  • Жұқпалы ауруларды диагностикалау үшін серологияда антиденелерді табу және өлшеу: вирусология, паразитология, бактериология және т.б.;
  • Төмен концентрациядағы ақуыздардың дозасы: белгілі бір плазма ақуыздарының (иммуноглобулин Е (IgE), ферритин, ақуыздық гормондар және т.б.), ісік маркерлерінің және т.б. спецификалық дозалары;
  • Шағын молекулалардың дозасы: стероидты гормондар, қалқанша безінің гормондары, препараттар ...

Ең жиі кездесетін жағдайлар: Ковид-19, Денге, ВИЧ, Лайма, аллергия, жүктілік

ELISA сынағы көптеген жұқпалы ауруларды диагностикалау үшін қолданылады:

Жыныстық жолмен берілетін аурулар (ЖЖБИ)

Соның ішінде гепатит, мерез, хламидиоз және ВИЧ. Денсаулық сақтау органдары ұсынған бұл СПИД-тің негізгі скринингтік сынағы: ол инфекциядан алты аптадан кейін АИТВ-ға қарсы антиденелердің және p24 антигенінің болуын көрсетеді.

Аймақтық немесе эндемиялық аурулар

Сары безгегі, Марбург вирусы ауруы (МВМ), Ладенге, Лайма ауруы, Чикунгунья, Рифт аңғары безгегі, Эбола, Ласса безгегі және т.б.

Ковид-19

Симптомдар басталғаннан кейін 2-3 аптадан астам уақыт өткен соң ELISA сынағы бір сағаттан аз уақыт ішінде анти-SARS-CoV-2 антиденелерінің болуын анықтауға мүмкіндік береді.

Пренатальды инфекцияларды тудыратын вирустық қоздырғыштар

Мысалы, токсоплазмоз, қызамық, цитомегаловирус, қарапайым герпес.

Басқа жағдайлар

Бірақ ол сонымен қатар анықтауда қосымшаларды тапты:

  • Жүктілік;
  • Аутоиммунды аурулар;
  • Тағамдық аллергендер: жалпы иммуноглобулиндердің E (IgE) мөлшерін сандық анықтау аллергияны бағалауға және емдеуге көмектеседі;
  • Гормоналды бұзылулар;
  • Ісік маркерлері;
  • Өсімдік вирустары;
  • Және тағы басқалары

Ковид-19 сынағының сенімділігі

SARS-CoV-2 антиденелерін анықтау аясында 2020 жылдың тамыз айында Пастер институты, CNRS, Inserm және Париж университеті жүргізген пилоттық зерттеу ELISA сынағының сенімділігін растайды: екі ELISA сынағы да қолданылған. мақсатты антигендер ретінде SARS-CoV-2 (ELISA N) бүкіл N протеині немесе вирустың жасушадан тыс домені (S). Бұл әдіс 90% -дан астам жағдайда антиденелерді анықтауға мүмкіндік береді, өте төмен жалған-оң көрсеткіш - 1%.

ELISA сынағының бағасы және өтемақысы

Медициналық рецепт бойынша талдау зертханаларында жүргізілетін Элиза сынақтары шамамен 10 еуро тұрады және медициналық сақтандырумен 100% өтеледі.

Тегін ақпараттық, скринингтік және диагностикалық орталықтарда (CeGIDD) жүзеге асырылады, олар АИТВ және SARS-CoV-2 үшін тегін болуы мүмкін.

пікір қалдыру